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色譜工作者常會碰到這樣的問題，什么時候該換色譜柱了?色譜柱的塔板數(shù)能體現(xiàn)色譜柱的狀態(tài)嗎?確定表明一支色譜柱應該“退休”的標準，從經(jīng)驗來看，當一支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時的百分之多少時就可以認為該色譜柱不能再使用了呢?只看塔板數(shù)作為評價色譜柱質量的指標合適嗎?在您的實驗室里是如何判斷一根色譜柱不可以再用了呢?塔板數(shù)是一個粗略的指標，不能作為評價色譜柱的標準。通常使用塔板數(shù)來考察色譜系統(tǒng)：將新柱子接到儀器上，根據(jù)色譜柱生產(chǎn)商提供的測試條件測試該色譜柱，你應該得到和分析報告上同...

一、峰丟失可能的原因及應采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器驗證。2.未接入檢測器，或檢測器不起作用，檢查設定值3.進樣溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調整4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調整5.無載氣流，檢查壓力調節(jié)器，并檢查泄漏，驗證柱進品流速6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進口端或檢測器末端，是可以補救的，切去柱斷裂部分，重新安裝二、前沿峰1.柱超載，減少進樣量2.兩個化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進樣量，使溫度降低10~20度，以使峰分開3.樣品冷凝，檢查進樣口...

先說說柱子能不能反沖的問題，色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會有什么問題的，從填料流失的角度來說，粒徑為5um，而篩板孔徑為2um，這種情況下正沖反沖都不會造成填料的流失;此外，從柱子裝填的角度來說，裝柱時是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的，與反沖時的液體流路方向相同，裝柱時那么高的壓力(通常大于40MPa)下用頂替液沖刷都沒有問題，難道區(qū)區(qū)1ml/min流速下的十幾個MPa會造成柱床松動?更何況反沖時通常用的要么是90%水、要么是90%或純的有機相，...

在色譜分析域中，允許實驗室出于提高檢測性能與效率的需要，對標準方法或方法中規(guī)定的儀器操作條件進行調整，但不能超出一定的規(guī)定。超出一定的調整都視為方法變動。1、HPLC流動相的pH值流動相制備過程中，水溶性緩沖液pH值可在標準規(guī)定值的±0.2pH單位范圍內調整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動相制備過程中，如果pH值變化滿足要求，則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內調整。3、HPLC流動相中各組分的比例流動相中組分的增減可以達到該組分在組成中所占...

高效液相色譜系統(tǒng)一般由高壓輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等。一、高壓輸液泵泵的種類很多，按輸液性質可分為恒壓泵和恒流泵；恒流泵按結構又可分為螺旋注射泵、柱塞往復泵和隔膜往復泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應用最多的是柱塞往復泵。二、進樣器高效液相色譜早期使用隔膜和停流進樣器，裝在色譜柱入口處。現(xiàn)在大...

氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，但也有例外，像安捷倫的氨基柱保長期保存要保存在純乙腈中，具體哪個廠家的柱子的保存方法要看柱子的說明書，根據(jù)要求來保存。說一下氨基柱的使用注意事項。1.正相使用1.1新柱子可直接用流動相。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再根據(jù)流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相...

1.流動相溶劑應選擇HPLC的溶劑或依此為標準的溶劑。流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內，為了防止雜物（固體）進入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會導致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時，或壓力溫度變化時容易產(chǎn)生大量氣泡，會導致泵誤動作和輸液不暢，檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。2.流動相恢復到室溫后使用。流動相溫度與室溫相差時，流動相在恢復到室溫前，基...