食品中防腐劑和甜味劑檢測(cè)

參考國(guó)標(biāo)（GB/T 23495-2009），利用全新高性能的LC500HPLC高效液相色譜儀，經(jīng)實(shí)踐檢測(cè)可提供苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的HPLC檢測(cè)方案，得出的結(jié)果準(zhǔn)確可靠，檢出限好，適用于食品中苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的測(cè)定，僅供廣大用戶參考。

　　以下是苯甲酸、山梨酸和安賽蜜、糖精鈉的詳細(xì)檢測(cè)方法。

1　儀器與試劑

1. 儀器

LC-500HPLC高效液相色譜儀，SPD-500紫外檢測(cè)器，手動(dòng)進(jìn)樣閥(7725i)，WK-500色譜工作站

色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；

超聲波水浴振蕩器；

食品粉碎機(jī)；

pH計(jì)；

天平：分度值為0.001 mg。

1. 試劑

甲醇：色譜純。

乙酸銨溶液：稱取1.54 g乙酸銨，加水溶解并稀釋至1000 mL，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾。

亞鐵化鉀溶液：稱取106 g亞鐵化鉀[K3Fe(CN)6•3H2O]加水至1000 mL。

乙酸鋅溶液：稱取220g乙酸鋅[Zn(CH3COO)2•2H20]溶于少量水中，加入30mL冰乙酸，加水稀釋至l000mL。

氨水(1+1)：氨水與水等體積混合。

2. 色譜條件

色譜柱：Vertex C18柱，250mm x 4.6 mm，5μm；

流動(dòng)相：甲醇+0.02mol/l乙酸銨溶液(5:95)；

　　流速：1 mL／min；

　　進(jìn)樣量：20μL；

　　檢測(cè)波長(zhǎng)230nm。

                            注：1-安賽蜜；2-苯甲酸；3-山梨酸；4-糖精鈉；混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖 

3　試樣溶液的制備

1. 含脂肪、蛋白的樣品

稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機(jī)攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后用轉(zhuǎn)移到100ml比色管中，并用少量水潤(rùn)洗干凈燒杯；　　加入5ml亞鐵化鉀溶液，搖勻，再加入5 mL乙酸鋅溶液，搖勻；根據(jù)PH計(jì)讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過(guò)濾；吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過(guò)濾，濾液待上機(jī)分析。

1. 不含脂肪、蛋白的樣品

稱取約10g左右樣品于燒杯中（固體樣品要用攪拌機(jī)攪碎），加入約60ml蒸餾水，再超聲波水浴振蕩10分鐘，然后轉(zhuǎn)移到100ml比色管中，并用少量水潤(rùn)洗干凈燒杯；根據(jù)PH計(jì)讀數(shù)，用氨水調(diào)節(jié)PH至接近中性；用水定容至100ml刻度，搖勻，用三角瓶,濾紙，玻璃棒，漏斗過(guò)濾；吸取濾液約1.5ml，用微孔濾膜過(guò)濾，濾液待上機(jī)分析。

 4　結(jié)果分析

1. 儀器精密度的測(cè)定

取濃度為苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度為10.0ug/ml，平行測(cè)定7次。

表1：精密度的測(cè)定結(jié)果

分析結(jié)果可以得出，每個(gè)組分峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于1％，表明儀器在選定條件下重現(xiàn)性好，*可以滿足分析測(cè)定的要求。

1. 回收率的測(cè)定

分析結(jié)果的準(zhǔn)確度可以用回收率來(lái)衡量。回收率越接近100％，測(cè)得的結(jié)果越接近真值，即準(zhǔn)確度越好。同時(shí)平行測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可以表明方法的重現(xiàn)性。

　　取清涼茶、樣品分別進(jìn)行加標(biāo)實(shí)驗(yàn)，加入苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜濃度均為10.00ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，平行測(cè)樣7次，進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)。測(cè)定結(jié)果見表2。

 表2：清涼茶的加標(biāo)測(cè)定結(jié)果和回收率

 　　從上表可以看出清涼茶的加標(biāo)測(cè)定的回收率：苯甲酸為98.5%-103.4%，山梨酸為98.3%-103.1%，糖精鈉為97.5%-104.3%,安賽蜜為98.4%-103.3%。各組分的回收率都接近100%，滿足日常檢測(cè)的要求。

7. 液相色譜儀器配置